Divulgação_RobertaPrelecionista: Roberta Rúbia Pinto Nogueira Lima
Orientador: F. Murilo Zerbini
Data: 29/11/2022, às 16h – via Zoom*

Os vírus são considerados a principal classe de patógenos emergentes, pois um grande número de doenças que surgiram nas últimas décadas são causadas por vírus. A emergência geralmente vem com virulência aumentada, como testemunhado recentemente com o surto de um novo coronavírus (SARS-CoV-2) que infectou humanos. Dentre os vírus de plantas, o gênero Begomovirus (família Geminiviridae ) é considerado um dos mais relevantes, pois seus membros podem causar perdas severas em culturas economicamente importantes. Esses vírus são transmitidos pela mosca-branca Bemisia tabacide forma persistente-circulativa e a única proteína viral necessária para aquisição e transmissão pelo inseto vetor é a proteína do capsídeo (CP). O CP medeia a especificidade do vetor e controla o transporte do vírus através do intestino da mosca branca e, para proteger o vírus da degradação, ele interage com um homólogo de chaperonina GroEL produzido por bactérias endossimbióticas. A CP é a proteína de begomovírus mais conservada, no entanto, nosso grupo de pesquisa recentemente descreveu um begomovírus bipartido com uma CP altamente divergente, denominado Sida yellow spot virus (SiYSV), infectando a planta não cultivada Sida acuta (Malvaceae). Está bem estabelecido que a CP é uma proteína multifuncional e é essencial no ciclo de vida viral.
Os objetivos do presente trabalho são determinar se o SiYSV é capaz de formar partículas geminadas e realizar a caracterização biológica e molecular do SiYSV. Para o primeiro objetivo, previmos a estrutura 3D do SiYSV CP usando AlphaFold e comparamos com outros CPs de begomovírus típicos por mTM-align. Em seguida, cortes ultrafinos de plantas infectadas foram observados em microscópio eletrônico de transmissão para detecção de partículas virais. Embora muito diferente na sequência, o SiYSV CP assume conformação semelhante à de outros begomovírus. No entanto, as partículas não foram observadas sob TEM. Para o segundo objetivo, a gama de hospedeiros do SiYSV foi avaliada e um ensaio de transmissão da mosca-branca foi realizado. B. tabacinão foi capaz de transmitir SiYSV e a interação entre CP e GroEL não foi confirmada por Complementação de Fluorescência Bimolecular (BiFC). Finalmente, a localização subcelular de proteínas codificadas por SiYSV foi observada em microscópio confocal e sua capacidade de suprimir o silenciamento de RNA analisada. Mostramos que essas proteínas tinham o mesmo padrão de localização esperado para begomovírus típicos, mas não pudemos observar nenhuma forte atividade de supressão de silenciamento. Juntos, esses resultados indicam que as proteínas codificadas pelo SiYSV podem atuar da mesma forma que os outros begomovírus, portanto, a possibilidade de que o SiYSV forme seu capsídeo não pode ser descartada, embora ainda não tenhamos observado suas partículas. Além disso, a incapacidade de B. tabacitransmitir SiYSV pode não estar relacionado à ausência de partícula viral, mas sim à falta de interação entre CP e GroEL.

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